PCR En Infarto Agudo De Miocardio

Comparación de microRNA-1 y troponina T cardíaca en el diagnóstico temprano de pacientes con infarto agudo de miocardio

Objetivo: medir el nivel de miR-1 circulante, la concentración de troponina T cardíaca (cTnT) en pacientes con IAM, así como analizar la utilidad de miR-1 como un biomarcador novedoso para el diagnóstico temprano de IAM y comparar su valor diagnóstico con el de la cTnT.

Muestra: 5 mL de sangre venosa de 26 pacientes con IAM y 28 voluntarios sanos colectada en tubos con anticoagulante K2-EDTA. 

Tipo de ácido nucleico: RNA nuclear.

Extracción del ARN: TRIzol LS® reagent (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) de acuerdo a las instrucciones del manufacturador y disuelto en 10 mL de agua tratada con dietilpirocarbonato (DEPC). 

Gen a amplificar: miR-1

Tipo de PCR: qRT-PCR

Pasos:

         Desnaturilización: 15 seg- 95ºC (40 ciclos)

         Hibridación: 30 seg- 60ºC (40 ciclos)

         Extensión: 15 seg- 95ºC (40 ciclos)

Visualización: EFO.

Bibliografía

• Li L. Comparison of plasma microRNA-1 and cardiac troponin T in early diagnosis of patients with acute myocardial infarction. World Journal of Emergency Medicine [Internet]. 2014;5(3):182. Available from: https://www.dropbox.com/s/on5xnpjif6wwnv2/Comparison%20of%20plasma%20microRNA-1%20and%20cardiac%20troponin%20T%20in%20early%20diagnosis%20of%20patients%20with%20AMI.pdf?dl=0

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PCR En Infarto Agudo De Miocardio

Asociación entre el polimorfismo 4G/5G en el gen del inhibidor del activador del plasminógeno-1 (PAI-1) y el infarto agudo de miocardio con elevación del ST en pacientes jóvenes.

OBJETIVO: Determinar la participación del polimorfismo 4G/5G en el gen del inhibidor del activador del plasminógeno tipo 1 (PAI-1) en pacientes con infarto agudo de miocardio con elevación del segmento ST y edad ≤ 45 años y su influencia en la regulación de la concentración plasmática de PAI-1.

MUESTRA: Sangre periférica

TIPO DE ÁCIDO NUCLEICO: ADN genómico

EXTRACCIÓN: QIAamp DNA Blood mini kit

TÉCNICA: Amplificación con PCR

PROCESO: Desnaturalización inicial a 94 °C por 3 min, seguido por 30 ciclos.

• Desnaturalización a 94 °C de 30 s,
• Alineación a 60 por 30 s,
• Extensión a 72 °C por 30 s,

Extensión lineal por 1 min a 72 °C

VISUALIZACIÓN: EFO con gel de agarosa

RESULTADO: Se obtuvo un producto amplificado de 99 pb (5G) y 98 pb (4G). El producto fue restringido mediante la adición de 1 U de la enzima específica Bsl I a 25 µl del producto amplificado e incubado a 55 °C para asegurar su completa restricción.

Bibliografìa:

• Salasa I, Leaños A, Sainzc I, Reyes E, Borrayo G. Asociación entre el polimorfismo 4G/5G en el gen del inhibidor del activador del plasminógeno-1 (PAI-1) y el infarto agudo de miocardio con elevación del ST en pacientes jóvenes. Revista Española de Cardiología [Internet]. 2010 [citado el 21 de Mayo de 2017];62(4):365-372. Disponible en: http://www.revespcardiol.org/es/asociacion-entre-el-polimorfismo-4g-5g/articulo/13135060/

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Prueba de Tamizaje y Prueba Confirmatoria Para Infarto Agudo de Miocardio

PRUEBA DE TAMIZAJE

• La gammagrafía de perfusión: Es una técnica ampliamente utilizada en la clínica para evaluar el flujo sanguíneo regional coronario para el diagnóstico y el pronóstico de la EC, es un  procedimiento de medicina nuclear se utiliza una pequeña cantidad de sustancia radioactiva llamada radionúclido (radiofármaco o trazador radioactivo) para ayudar en el examen del tejido en estudio. Evalúa el funcionamiento del corazón y el flujo sanguíneo

• Criterios de Framingham: El diagnóstico de insuficiencia cardiaca requiere de la presencia simultánea de al menos 2 criterios mayores ó de 1 criterio mayor y 2 criterios menores

Mayores:

Disnea paroxística nocturna, Ingurgitación yugular, Estertores, Cardiomegalia radiográfica (incremento del tamaño cardiaco en la radiografía de tórax), Edema agudo de pulmón, Galope con tercer ruido, Reflujo hepato-yugular, Pérdida de peso > 4,5 kg en 5 días en respuesta al tratamiento

Menores:

Edema bilateral de miembros inferiores, Tos nocturna, Disnea de esfuerzo, Hepatomegalia, Derrame pleural, Disminución de la capacidad vital a 1/3 de la máxima registrada, Taquicardia (frecuencia cardiaca > 120 lat/min)

 PRUEBA CONFIRMATORIA

• La electrocardiografía: Consiste en el registro gráfico de la actividad eléctrica que se genera en el corazón. Aporta datos sobre función cardíaca, trastornos del ritmo y de la conducción, hipertrofia de cavidades y ayuda al diagnóstico de cardiopatías congénitas o adquiridas de tipo infeccioso, inflamatorio, metabólico o isquémico. Su normalidad no siempre descarta afectación cardíaca.

Bibliografía:

• Medicalcriteria.com. Criterios de Framingham para el Diagnóstico Clínico de Insuficiencia Cardíaca - MedicalCRITERIA.com 2010 [citado el  14 de Mayo de 2017]. Disponible en: http://www.medicalcriteria.com/es/criterios/framingham_es.htm
• Portillo M. ELECTROCARDIOGRAFÍA: TÉCNICA DE INTERPRETACIÓN BÁSICA. Cardiología Infantil Servicio de Pediatría Hospital del SES de Mérida [Internet]. 2015 [citado el  14 de Mayo de 2017];1(1):57-59. Disponible en: http://www.spapex.es/pdf/taller_ekg.pdf

 

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Alteraciones de la Epigenómica en el Infarto del Miocardio

Dentro de las alteraciones epigenómicas del Infarto del miocardio, encontramos que el exceso de adiposidad tiene un papel protagónico en su desarrollo, libera a la circulación factores del complemento y citoquinas proinflamatorias, particularmente interleuquina 6 (IL-6) y factor de necrosis tumoral alfa (TNF-a) que estimulan la producción de proteína c-reactiva (PCR), un marcador inflamatorio con alta sensibilidad para demostrar la presencia de inflamación sistémica, lo que constituye un alto riesgo de desarrollo de infarto agudo de miocardio.

Bibliografía: 

• López, P. Papel de las adaptaciones epigenéticas en el riesgo de enfermedades cardiovasculares en la población latinoamericana. Revista MED. 2011;19(1): 93-99. disponible en: http://www.scielo.org.co/pdf/med/v19n1/v19n1a10

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